改革教学手段与方法，增强教学效果
1加强课堂交流与互动
基因工程的传统教学模式基本上是老师讲、学生听，学生的学习状况也是上课抄笔记、考前背笔记、考后全忘光，在整个授课过程中学生只是被动的接受知识，不主动思考，教学效果差。长期下来学生思维迟钝，无学习的积极性。为避免这种现象的发生，笔者改革了教学方法。在教学方法上，课堂讨论式教学法是对传统讲授教学的有效补充，教师对本节课的重点和难点设计一定的问题，引导学生思考和交流，学生首先独立思考问题，再进行小组讨论、大组汇报交流，学生在思考、分析、实践和交流这一过程中自觉地接受新知、探索疑难、总结规律，获得了学习的主动权，充分调动了课堂中教师与学生、学生与学生以及学生自我反思等多向信息交流方式，在交流中完成教学目标的同时，使学生的思维能力得到提升，创新精神得到体现。这种教学方法彻底改变“灌输式”教学中学生完全处于被动受教的地位，教学效果良好，大大提高了学生学习的兴趣。
2现代教学与传统教学相结合
基因工程知识信息量大，直观性强，传统的教学手段无法让学生直接体会某些原理及具体实验操作，从而加大了学习和理解的难度。使用多媒体、影像资料等现代化教学手段，可以在有限的时间内提供给学生较大的知识信息量，同时还能激发学生兴趣、加深学生对知识点的理解。因此，笔者制作了适合甘肃农业大学生物技术专业学生学习的多媒体课件，该课件图片、动画、影像较多，直观地表现出基因工程的原理、技术等。在授课过程中将传统的教师讲授、学生讨论及现代多媒体课件教学手段相结合，大大提高了学生学习的积极性，教学效果显著。
以科研促教学，提高授课质量
1科研融入课堂教学，增强学生学习兴趣
授课教师在授课过程中，应立足生命学科发展的特点，充分发挥自身科研优势，结合授课内容将科研工作内容融入到课堂教学，促进教学内容更新、教学方法改进，增强学生学习兴趣，让学生真正感受到学以致用。例如在给学生讲述“目的基因的转化”、“转基因植物表达检测”等章节内容时结合自己的研究课题“应用拟南芥K+转运蛋白基因（AtHKT1）提高马铃薯耐盐性的研究”讲述具体的方法、操作过程中遇见的问题及解决方法，使学生认识到现代农业的发展与基因工程密切相关，将枯燥、抽象的理论融于实践，扩大了学生的视野，收到较好的学习效果。另外，还可以介绍以往学生的研究课题，增强学生对科研工作的信心，使其认识到自己完全有能力、有条件进行科学研究，也应该在研究中做出自己的贡献，大大激发其学习的热情。
（一）调整实验课与理论课的设置
根据课程的需要，申请加大了试验课的课时数，加开了基因组DNA提取和RNA提取及RT-PCR试验和体外重组转化试验，使学生完全接触到了分子生物学中的基本操作技术。在毕业设计时就可以独立的进行相关的研究。为了使理论紧密联系实践，加深对基因工程技术的深刻理解，我们根据基因工程课程内容，每一单元授课完毕后安排相应的实验课。调整后的课程安排对同学们加深技术理解起到了重要辅助作用。比如质粒载体讲完后安排了质粒提取和酶切实验。核酸提取技术讲完后安排了大分子DNA提取和RNA提取实验等。每讲授完一门基因工程常用技术即设置一个独立的实验。这样理论紧密联系实践的课程设置，极大加深了学生对课堂授课内容的印象，学习兴趣日渐浓厚，实验课动手操作的主动性较初始明显增强。此外，前期基因工程教学中由于时间限制，往往分大组实验，不能保证每个学生都能参与试验，课时调整后，加了实验考核环节，要求每个实验学生必须亲自操作，从而保证每个人都能掌握基本的操作技能，同时加深理解理论课内容，这在后期的课程结课考试时学生对理论知识尤其与试验相关的部分内容的掌握方面效果非常明显。
（二）设立综合大实验
为了使学生能够更清晰的了解和掌握基因工程的基本路线，依据基因工程的基本操作步骤，在学生毕业前的第六学期，开设了以重组体的构建、转化、筛选和检测以及诱导表达为主线的基因工程综合大实验，锻炼学生整体实验能力。实验中包括目的基因的分离、质粒提取，酶切、目的基因片段的回收等实验操作。通过这一连续实验，学生不仅能够掌握基因工程的实验方法和技术，且对基因工程基本操作路线有了整体的认识和把握。这一整套试验可以锻炼学生对出现的问题进行分析和解决的能力，且能加深理论知识的掌握。根据理论知识调整试验的体系，可以加深理论知识的理解同时，提高了实验的成功率。根据学生的反馈，综合大实验的系统的实验过程培养了学生的动手能力和分析问题解决问题的能力，提高了学生对基因工程课程的热情和兴趣;很多学生因为在该课程教学中对基因工程相关领域内容产生了浓厚兴趣，在课外参加了相关的创新实验研究项目取得了预期的教学效果。
二、理论内容及讲课方法的改革
（一）教学内容的改革
由于生命科学领域功能基因组时代的研究成果日新月异,基因工程技术处速发展的前沿，因此在讲授基因工程主要理论内容的基础上，关注生命科学领域的最新研究成果及国内外研究动态，贯穿于相关的教学内容中。比如基因芯片、基因表达等内容；当前医学领域里应用基因敲除进行一些疑难杂症的疾病治疗；RNAi技术进行功能鉴定等，从而使学生能学习课程的同时了解基因工程当前的研究成果和应用状况，提高学生学习的积极性。此外，通过与实际案例相结合将基因工程的整个过程融于教学中。如观赏园艺因为其功用主要用于观赏而不涉及大家所关注的对人体健康及伦理学的影响，其中花期调控是一些观赏植物的主要育种方向。而利用基因工程实现花期调控的第一步是克隆控制花期的目的基因。在得到目的基因后进行载体的选择和构建，连接转化、表达分析等。
（二）教学方法和手段的改革
基因工程的一些概念抽象，难懂，全英文教学并不利于学生对课程的学习。而全中文形式的教学不利用学生的学术交流，因此教学模式采用中文为主的授课形式，同时对一些专业术语附加英语对照，从而使学生理解专业内容的同时，掌握大量基因工程中的专业术语，如，基因工程（Geneticengineering）、载体(vector)、限制与修饰体系(restrictionandmodification)重组(recombinant)、反转录PCR(RT-PCR)等。对学生阅读相关专业学术文献，有效地把握科研动态，开展科学研究与技术创新具有很大的帮助。在课程学习中鼓励学生关注相关领域的研究并提交课程报告，参与课程教学。这种教学方式使学生在有限的课时中接受基因工程相关的新观念，而且推动学生利用课后时间检索和自学一些基因工程的新技术、新成果，增强学习兴趣与能动性。
关键词:基因;应用
基因在农业生产上的应用已经非常广泛,但其中的道理未必广为人知。那么所谓基因到底是什么呢?它是控制生物性状的基本单位,记录着生物生殖繁衍的遗传信息。并且通过修改基因能改变一个有机体的部分或全部特征。它的作用主要是以转基因技术和基因克隆技为核心。通过它们改良动植物的品种,从而大大提高经济效益。那么下面我们就谈谈它们是怎样为人类服务的呢?
一、转基因技术
转基因技术就是按照人们预先设计的生物蓝图,把所需要的基因从一种生物的细胞提取出来,在体外进行“外科手术”,然后把所需要的基因导入另一种生物的细胞中,从而有目的地改造生物的遗传特性,创造出符合人类需要的新品种。转基因技术能培养出多种快速生长的转基因鱼、转基因羊、产奶量高的转基因牛等,还能培育出抗旱、抗涝、抗盐碱、抗枯萎病和抗除草剂的转基因作物,还培育出抗虫作物,科学家将杀虫基因转入植物体内后,植物体内就能合成霉素蛋白,产生这种霉素蛋白基因的作物有烟草、马铃薯、番茄、棉花和水稻等,其中效益最大的是抗虫棉。
二、基因克隆技术
“多莉的诞生”意味着人类可以利用动物的一个组织细胞,像翻录磁带或复印文件一样,大量生产出相同的生命体。利用它可以拯救濒临灭迹的物种,或是复制一些优良品种等等。然而在进一步细想克隆,却也着实让人深虑。首先,若是无节制地“复制”某种物种,就会打破自然界的生态平衡,破坏优胜劣汰的自然法则,给自然界带来了混乱。其次,从理论上说“克隆”哺乳动物的成功,即为“克隆”人类准备了前提条件,再经过技术的不断改善,毫无疑问,不久以后就能“克隆”出人。对此杭州大学生命科学院院长、浙江省生物工程学会副理事长黄纯农教授认为,不必过分担心。他说,当前“克隆”技术还有完善的过程,暂时达不到大量“复制”人的地步。再者各地已相继制定了法令,为“克隆”人进行限制。当然,“克隆”技术的产生,归根到底是利大于弊,它将被广泛应用于人类,前景灿烂,方兴未艾。科学的进步和人的观念的变化,是无法阻止的。
三、应用基因技术的优点
基因工程的发展促使它成为生命科学研究的核心学科。一般高校都将基因工程这门课作为专业必修课在大三的第二学期开设，其先修课程为生物化学、遗传学以及分子生物学等。基因工程的课程内容具有两个特点:一是教学内容与其他学科紧密相连。基因工程不仅与生物化学等基础课程的内容相互联系、交叉重叠，同时又与细胞工程、蛋白质工程、微生物工程等应用性课程相互呼应与衔接。二是内容涵盖面广，更新发展快。随着人类基因组计划的完成，生命科学的研究已经由基因组时代进入到后基因组时代，单纯的基因测序以及基因工程技术已经不能满足人类对生命信息的探索与追求。后基因组时代到来的标志就是功能基因组学研究的兴起。功能基因组学研究涉及转录组、蛋白质组以及代谢组等多个方面，多学科的交叉研究使其发展迅速。综上两个特点，为了避免课程知识上的教学重复，同时又能在有限的教学课时内将基础知识与最新、最前沿的研究信息最大程度地传授给学生，笔者对课程的教学内容及其对应的教学课时进行适当的调整。以往的基因工程教学内容共有11章32学时，可归纳为4个部分:第1章，基因工程学发展历史概述、基因工程的基本概念(4课时);第2、3章，基因工程的基本原理及技术，主要围绕基因工程的基本构件载体和工具酶(12课时);第4～10章，基因工程实施的三大步骤，包括DNA体外重组、重组DNA导入宿主细胞后扩增和表达以及基因工程后处理(12课时);第11章，基因工程的应用与前景(4课时)。笔者在此基础上对教学内容进行了适当合理的取舍与增加，做到突出重点，加强基本概念和原理的理解，通过列举实际应用研究来介绍相关的技术与方法。同时整合课时分布，在原有的32课时中拿出8课时介绍功能基因组学研究的知识。其内容主要围绕克隆与表达后的目的产物(蛋白质)的提取、分离、纯化与鉴定的方法、原理以及技术。调整后的课程安排如表1。通过此番改革教学内容，一方面可以开拓学生的视野，帮助学生了解基因工程以及功能基因组学的理论知识和实际应用领域;另一方面也可以激发学生学习基因工程的积极性与主动性。
2教学手段与方法的改良
传统的基因工程教学方法在水产类高等学校中多以板书结合多媒体的方法来讲解概念、原理以及性质等内容，其过程相对机械、枯燥，使得学生难以理解所学内容。对此，笔者通过多媒体教学与自制模型演示相结合的方法取代原有的传统教学。由于基因工程的很多内容相对抽象，仅仅通过教学技术具有图文声像随意组合、灵活多变的特点，为学生创造了良好的学习情境。通过功能强大的各种计算机软件把一些很难理解的内容做成动画影片，化难为易、化静为动、变抽象为形象，使学生对上课产生兴趣，促进学生对知识学习的渴望。同时，利用自制的模型讲解课程中的重点以及难点。例如:在介绍限制酶的切割位点时，让学生手持模型，分别角色扮演限制酶和基因序列，在排列位置的互换中了解3种切口的方式以及位置。这样的教学方法不仅形象，也让学生在互动中快速、深刻地记忆知识要点。另外，通过当下研究的前沿话题为例，先提出一个问题，引导学生运用其他课程所学过的或者自身所积累的知识来联想、分析、讨论，自己设计解答此问题的方法或实验流程。然后老师再参与其中，在讨论和修改方法以及实验流程的过程中，引出所要讲授的新的概念和知识要点。例如介绍表达物质(蛋白质)的鉴定时，老师会先提出问题:基因克隆表达出的物质是什么?这些物质是由什么组成的?鉴定这些物质可以使用什么方法?然后引导学生回顾生物学中心法则，得出基因表达物质为蛋白质，蛋白质是由氨基酸组成等所学过的知识，由此学生可归纳出氨基酸测序法等鉴定蛋白质的方法。最后老师再在此基础上补充出WesternBlot法、生物质谱技术等新的鉴定方法。这样的讲课方式让学生回到课堂上的主角位置，在复习了以往的知识要点的同时也加深了学生对新知识的理解与记忆，在一定程度上启发了学生如何去发现问题和解决问题。此外，基因工程是一门实践性很强的课程，在讲授理论课的同时，实验课的安排也是非常重要的。设计好与理论课相配套的实验课程，可以使学生加深对基因工程学理论的学习和理解，达到理论和实践相结合的目的。对此，各大高校均在基因工程实验课上进行了改革创新，但有一点总被忽略，那就是实验研究对象。目前，国内大多数高校基因工程实验课所使用的研究对象均为果蝇等无脊椎模式生物。这种情况对于普通高校而言是可行的，但是对于拥有特色学科的水产类高校而言，研究对象也应具有其专业特点。所以本实验课所使用的研究对象是斑马鱼这种海洋模式生物。研究对象的改变虽微不足道，但是能让学生更好地理解自己所学专业的特色，在实践操作中加深对所属专业的热爱。
3成绩考核
中国传统的应试教育产生了“高分决定一切”的迂腐思想。随着国家教育体系改革的不断推进，学生对于专业知识的掌握与否，已经不能仅从一张考卷成绩的高低来反映，考核成绩的结构应向多元化的方向发展。基因工程的最终考核成绩主要包括两部分:平时成绩占40%，其中课堂出勤率10%、课堂讨论10%、课堂小考10%以及实验报告10%;期末考试成绩占60%。这样的考核体系改变了过去注重结果忽略过程的做法，让学生在平时将知识一点一滴地积累起来。同时，也让授课教师能够及时得到教学效果的反馈信息，进一步提高教学水平。
4结语
很多人在写论文的时候不知道为什么要写参考文献，认为论文的内容才是最重要的，对参考文献也不是特别重视，参考文献的写作对论文来说是有很大的影响的，可以通过它来看出论文的学术研究价值。下面是千里马小编收集的基因工程论文参考文献，希望可以给大家带来帮助。
基因工程论文参考文献：
[1]贺明艳.基因工程疫苗在动物疾病防治中的应用[J].中国畜牧兽医文摘，2015（11）：222，175.
[2]王玉堂.疫苗在水生动物疾病预防中的作用及应用前景（二）[J].中国水产，2016（5）：65-68.
[3]邹伟斌，陈丹，谢少霞，等.基因工程活载体疫苗的研究进展[J].广东畜牧兽医科技，2016，41（4）：1-5，8.
[4]田尊明，李祯祺，于建荣.疫苗相关专利的全球研发态势分析[J].生物产业技术，2014（3）：66-72.
[5]徐云.转型背景下新建本科院校应用型人才培养模式的思考[J].新余学院学报，2015（2）：11-14.
基因工程论文参考文献：
[1]李玲，孙文松.基因工程在农业中的应用[J].河北农业科学，2008.12（12）：149-15.
[2]朱旭芬，赵小立，丁鸣，金文涛.“基因工程实验”精品课程建设的探索与思考[J].中国大学教学，2011.8：54-55.
[3]任如意，魏继承.基因工程实验教学改革初探[J].高等理科教育，2008.6：112-114.
[4]阮小蕾，李华平.研究生《基因工程实验技术》课程教学改革探索[J].中国科教创新导刊，2009（8）：62-63.
[5]姜大刚，李静，姚涓.研究生基因工程实验教学改革探讨[J].生物学杂志，2011.28（2）：103-104.
[6]马婧，眭顺照，李名扬.园艺专业研究生《基因工程实验技术》课程教学探索与实践[J].西南师范大学学报（自然科学版），2014.39（6）：152-155.
基因工程论文参考文献：
[1]陈观水.农业院校基因工程课程教学改革的探索[J].中国科技信息，2011（18）：140.
[2]马静云.基因工程课程教学改革的探索与实践[J].教育教学论坛，2011（07）：121-122.
[3]苏泽红，练高建，何淑雅，等.生物科学专业基因工程教学改革初探[J].广东化工，2013，40（18）：157.
[4]刘晓丹.应用型本科院校基因工程课程教学改革探析[J].现代交际，2016（02）：236.
[5]李晓薇.基因工程教学改革的思考[J].创新教育，2016：120.
[6]肖国学.生物技术专业基因工程课程反思性教学探讨[J].生物技术世界，2015（02）：135-136.
[7]李晓薇，董园园，李海燕.《植物基因工程》教学实践的几点体会[J].高教学刊，2016（03）：116，119.
[8]李相前.应用型生物工程专业基因工程教学思考与实践[J].广州化工，2008，36（04）：64-65.
[9]安新民，李云.网络资源在“基因工程”课程教学中的应用[J].中国林业教育，2014，32（02）：60-62.
[10]王敏，黄璐琦，李萌萌.药用植物基因工程研究和应用展望[J].中国中药杂志，2008，33（12）：1365-1370.
[11]董妍玲，潘学武.应用型人才培养目标下基因工程实验教学改革的实践[J].黑龙江畜牧兽医，2013（06）：175-176.
[12]裔传灯，周勇，张昌泉，等.基因工程实验教学的改革与实践[J].科教导刊，2015（03）：103-104.
[13]赵春梅，薛仁镐，郭宝太.基因工程实验教学的改进与问题剖析[J].教育教学论坛，2015（50）：256-257.
论文摘要基因工程在植物花色改良中正发挥着越来越来重要的作用，综述了植物花色苷基因工程所采用的方法和策略，包括花色苷生物合成基因的分离克隆、基因的遗传转化和基因工程改良的基本策略。
利用基因工程改良花色是花卉分子育种的重要手段，不再受植物亲缘关系的限制，花色改良的效果通过目测和少量辅助手段即可判断[1]。花色苷是植物次生代谢过程中产生的黄酮类物质，它是花色素与糖以糖苷键结合而成的一类化合物，广泛存在于植物各组织细胞的细胞液中，使植物呈现从红、紫到蓝等的不同颜色[2]。花色苷的生物合成途径是被最为广泛而深入研究的植物次生代谢途径，特别在主要模式植物中，已经有了清楚的认识[3]。许多花色苷生物合成途径中的关键酶基因和调节基因均已经从不同植物中克隆到[3，4]。转基因花卉主要用于观赏，易被公众接受，具有传统育种手段难以比拟的优越性，必将给花色改良带来革命性的影响，已成为当前花卉育种研究的热点。
1花色苷生物合成基因的分离和克隆
植物花色苷基因工程改良遵循一般植物基因工程规律，了解特定色素生物合成途径、克隆关键酶的基因是植物花色基因工程改良理论依据和前提。首先是花色苷生物合成途径基因的克隆，第1个被分离的花色苷合成酶基因是CHS基因，它是从欧芹（Petroselinumcnispum）悬浮细胞用差异杂交分离到的[5]；以后利用转座子标签、PCR扩增、异源杂交、差异cDNA克隆、电子克隆、蛋白质纯化与差异筛选等方法分离克隆到了多个花色苷生物合成相关基因。花色苷的生物合成是从莽草酸代谢途径合成苯丙氨酸和脂肪酸合成代谢合成丙二酰CoA开始，经苯丙烷类途径合成[6]。根据基因对花色苷生物合成的作用可分为结构基因和调节基因[7]。结构基因直接编码花色苷生物合成途径中的生物合成酶类，如PAL、4CL、CHS、CHI、F3H、DFR、F3′H、F3′5′H、ANS、3GT等基因；另一类是调节基因，它们调控花色苷生物合成基因的表达强度和模式，同时控制花色苷在时空上的变化，如AN1、AN2、JAFl3和AN11等[8]。
2基因遗传转化的方法
基因转化的主要方法有农杆菌介导法[9]、基因枪法[10]、花粉管导入法[11]、化学试剂诱导法[12]和电穿孔法[13]等。
农杆菌介导的基因转化方法是迄今最可靠、最有效的转化方法。现在的转基因再生植物中，80%以上是用这种方法获得的，主要有叶盘转化法、整株感染法和原生质体转化法[14]。
基因枪法又称微弹轰击法，是由康乃尔大学Sanford等[10]建立的基因导入方法，其基本原理是利用亚精胺、聚乙二醇的粘附作用将外源DNA包被在微小的金粒或钨粒表面，然后在高压的作用下微粒被高速射入受体细胞或组织。
花粉管通道法最早由周光宇提出[11]，其基本原则是利用开花植物授粉后形成的花粉管通道使外源DNA沿着花粉管进入胚囊，转化尚不具备正常细胞壁的卵、合子或早期胚胎细胞的方法。
化学诱导法[12]的主要原理就是聚乙二醇、多聚-L-鸟氨酸、磷酸钙在pH值较高的条件下诱导原生质体摄取外源DNA分子。
电穿孔法又称电激法，首先由Neumann提出[13]，是在高压电脉冲作用下，在新鲜分离的原生质体的质膜上形成可逆性的瞬间通道，从而发生外源DNA的摄取。
此外，还有脂质体转化法、低能离子束法、病毒载体转化法、转座子介导法和浸泡法等。
3花色苷基因工程改良的基本策略
花色苷合成由多个代谢步骤、多基因决定，所以利用基因工程改造花色苷一个重要策略就是还原法，即欲修饰某个性状时，先要明确决定该性状的特异生化物质，然后对形成该生化物质的代谢途径进行基因工程操作。具体就是分析催化各反应步骤的酶、编码这些酶的基因及其表达调控[15]。多步骤的代谢途径有限速步骤，而限速步骤对整个代谢途径起着决定性作用，所以对限速步骤的遗传操作往往是还原法的重要突破口。增强某种关键酶的表达，往往可使花色苷合成途径朝生成其催化产物的方向进行；而抑制该酶的表达，则会使反应朝合成途径的另一分支进行，导致另一种产物的积累[16]。
3.1反义抑制法
利用基因工程技术进行花色苷修饰的常用方法是反义抑制法，首先明确决定花色苷的特异生化物质，然后分析该生化物质代谢途径中催化各反应步骤的酶，克隆编码这些酶的基因，反向转入到目的植株中，外源DNA转录产物与内源的互补mRNA结合，而抑制目的植株中这些生化物质的合成[17]。利用该技术已在矮牵牛[17，18]、[19-21]等几种观赏植物中进行成功了花色修饰。
3.2共抑制法
共抑制法，又称正义抑制法，即正向导入1个或几个内源基因的额外拷贝，反而抑制该内源基因转录产物mRNA的积累，进而抑制该内源基因的表达[22，23]。该技术在矮牵牛[24]、[19]、蓝猪耳[25]等花卉的花色修饰方面已取得成功。
3.3导入调节基因
如果植物已具色素合成结构基因，只是因为组织特异性或缺乏调节基因表达产物的激活而不表达时，导入调节基因并使之适当表达可活化特定的结构基因，改变花色。如Quattrocchio等[26]将系列花色苷合成的调节基因转入矮牵牛，获得红色的愈伤组织和粉红色花色的转化株。Kim[27]将玉米C1基因通过农杆菌介导转入烟草，使株花瓣变狭长，颜色显著变浅。
3.4导入新的外源基因
Meyer等[28]首次将源自玉米的编码DQR的A1基因导入矮牵牛白花突变体中，产生了开砖红色花的矮牵牛。1992年澳大利亚CalgenePacific公司与日本Sundory公司合作向蔷薇中导入F3′5′H基因获得成功，同年该公司在矮牵牛中导入该基因获得蓝色矮牵牛[29]。此外，在花色基因工程操作中，也可以导入调节基因以增强或减弱原有代谢产物表达，或导入其他与花成色作用有关的基因，如pH基因、辅助色素基因、细胞形状基因等，也可以同时导入与某种花色有关的多种基因。
4植物花色苷基因工程改良的安全性
植物花素属次生代谢产物，与植物防御系统相关。因此，基因工程改良花色可能妨碍植物的生存。同时，无法预测外源基因在转基因植株遗传背景中会产生的作用和后果[1]，在环境安全性方面存在潜在的威胁，如转基因花卉杂草化、产生对人类有害的代谢物、因基因漂流而污染环境、给传统的传粉者带来困惑等。
5参考文献
[1]赵昶灵，郭维明，陈俊愉．植物花色呈现的生物化学、分子生物学机制及其基因工程改良[J]．西北植物学报，2003，23（6）：1024-1035.
[2]WINKEL-SHIRLEYB.FlavonoidBiosynthesis.Acolorfulmodelforgenetics，biochemistry，andbiotechnology[J].PlantPhysiol.，2001（126）：485-493.
[3]HOLTONT，CORNISHEC.Geneticsandbiochemistryofanthocy-aninbiosynthesis[J].PlantCell，1995（7）：1071-1083.
[4]BARTELB，MATSUDASPT.Seeingred[J].Science，2003（299）：352-353.
[5]KREUZALERF，RAGGH，FAUTZE，etal.UV-inductionofchalonesynthasemRNAincellsuspensionculturesofPetrosklinumhortense[J].Proc.Natl.Acad.Sci，1983（80）：2591-2593.
[6]TANAKAY，TSUDAS，KUSUMIT.Metabolicengineeringtomodifyflowercolor[J].Plantcellphysiology，1998（39）：1119-1126.
[7]SPRINGOBK，NAKAJIMAJI，YAMAZM，ETAL.Recentadvancesinthebiosynthesisandaccumulationofanthocyanins[J].Nat.Prod.Rep，2003（20）：288-303.
[8]DEJONGWS，EANNETANT，DEJONGDM，etal.CandidategeneanalysisofanthocyaninpogmentationlociintheSolanaceae[J].Theor.Appl.Genet，2004（108）：423-432.
[9]HORSCHRB.Asimpleandgeneralmerhodfortransferringgenesintoplants[J].Science，1985（227）：1229-1236.
[10]SANFORDJC.Biolisticplanttransformation[J].Planta，1990（79）：206-209.
[11]周光宇，翁坚，龚蓁蓁，等．农业分子育种——受粉后外源DNA导入植物技术[J]．中国农业科学，1988（21）：1-6.
[12]KRENSFA.InvitrotransformationofplantprotoplastswithTi-plasmiddNA[J].Nature，1982（296）：72-74.
[13]NEUMANNE.Genetransferintomouselyomacellsbyelectroporationinhighelectricfields[J].EMBOJ，1982（1）：841-845.
[14]刘建强，孙仲序.植物基因转化方法的研究概况[J].河北果树，2005（5）：4-6
[15]付永彩，刘新仿，曹守云，等.水稻抑制衰老的嵌和基因的基因枪转化和表达分析[J]．农业生物技术学报，1999，7（1）：17-22.
[16]赵云鹏，陈发棣，郭维明．观赏植物花色基因工程研究进展[J].2003，20（1）：51-58.
[17]何小铃，王金发．观赏花卉的品质基因及其基因工程问题[J]．植物生理学通讯，1998，34（6）：462-466.
[18]VANDERKROLAR，LENTINGPE，VEENSTRAJ.Anantisensechalconesynthasegeneintransgenicplantsinhibitsflowerpigmentation[J].Nature，1988（333）：866-869.
[19]GUTTERSONNC，NAPOLIC，LEMIEUXC.Modificationofflo-wercolorinflorist’sChrysanthemum：productionofawhite-genetics[J].Bio.Technology，1994（12）：268-271.
[20]ELOMAAP，HONHANENJ，PUSKAR.AgrobacteriummediatedtransferofantisensechalconesynthasecDNAtoGerberahybridainhibitsflowerpigmentation[J].Bio.technology，1993（11）：508-511.
[21]AIDAR，KISHIMOTOS，TANAKAY.Modificationofflowercolorintorenia（ToreniafournieriLind.）bygenetictransformation[J].PlantScienceLimerick，2000（153）：33-42.
[22]NAPOLIC，LEMIEUXC，JORGENSENR.Introductionofachimericchalconesynthasegeneintopetuniaresultsinreversiblecosuppressionofhomologousgenesintrans[J].PlantCell，1990（2）：279-289.
[23]RJORGENSENRA.Co-suppression，flowercolorpatternsandmeta-stablegeneexpressionstates[J].Scence，1995（268）：686-691.
[24]傅荣昭，马江生，曹光成，等.观赏植物色香形基因工程研究进展—文献综述[J].园艺学报，1995，22（4）：381-385.
[25]SUZKIKI，XUEHM，TANAKAY，etal.FlowercolormodificationofToreniahybridabycosuppressionofanthocyaninbiosynthesisgenes[J].Mol.Breed，2000（6）：239-246.
[26]QUATTROCCHIOF，WINGJF，LEPPONHT.Regulatorygenescontrollinganthocyaninpigmentationarefunctionallyconservedamongplantspeciesandhavedistinctsetsoftargetgenes[J].PlantCell，1993，5：1497-1512.
[27]KIMY.ExpressionanalysisofmaizeC1regulatorygeneintransgenictobaccoplants（Nicotianatabacumcv.Xanthi）[J].J.Kor.Soc.Hort.Sci.2001（42）：487-491.
关键词：路基；工程质量；防治
路基是公路的重要组成部分，是按照路线位置和一定技术要求修筑的带状构造物，承受由路面传来的荷载，应有足够的强度、稳定性和耐久性。路基的强度与稳定性，受水、温度、土质等客观因素影响，同时也受行车荷载的作用，路基设计、施工方法及养护方法是否正确等人为因素制约。
1、路基工程质量通病的特征及成因1.1特征路基整体或局部不均匀沉降；路基纵横向开裂；路基滑动或者边坡滑坍。1.2成因工程地质条件不良，原地面比较软弱（如泥沼地段等）若填筑前未经换土或软基处理，易形成压缩下沉或挤压位移；工程地形条件复杂，当路堤穿过沟谷时，沟谷中心填土最大，向两端逐渐减低，由于填土高度不同而产生不均匀下沉；水文气候等因素，降雨量过大、洪水、冰冻、积雪或温差过大，都可能使高填路堤产生不均匀下沉；路堤填料，若填料中混入种植土、腐殖土或泥沼等劣质土，或土中含有未经打碎的大块土或冻土等，填石路石料规格不一，性质不匀，乱石中空隙很大，在一定期限（例如雨季）可能产生局部明显下沉；
设计方面，如断面尺寸不合理，边坡取值不当，排水、防护与加固不妥，未对高填路堤进行稳定性验算，且施工工艺、填料未作特别要求说明；施工方面，填筑顺序不当，未在全宽范围内分层填筑，填筑厚度不符合规定，填料质量不符合要求，水稳定性差，原路边坡没有去除植被、树根，未做台阶处理；不同性质的填料混填，因不同土类的可压缩性和抗水性差异，形成不均匀沉降，路基填料含水量控制不严，又无大型整平和碾压设备，使压实达不到要求；施工过程中未注意排水，遇雨天时，路基积水严重，无法自行排水，有的积水浸入路基内部，形成水囊，晴天施工时也未排除积水控制含水量就继续填筑，以致造成隐患，施工单位责任心不强，自检控制不到位。
2、预防处治措施
2.1、设计方面
2.1.1、做好地质勘探调查对路线经过的地形、地貌、水文地质条件进行详细探查，尤其要对特殊路基段提供详细的设计资料，地表不良路段，设计可考虑换土或掺白灰、水泥及铺设土工布等措施。
2.1.2、确保路基最小填筑高度路基最小填筑高度必须保证不因地面水、地下水、毛细水及冻胀作用的影响而降低其稳定性，按照路基设计规范要求，根据土基干湿类型及毛细水位高度，确保路基最小填筑高度，当路基填筑高度受限制而不能达到规范规定时，则应采取相应的处治措施，如：换填砂砾、石渣等透水性材料设置隔离层或修筑地下渗透沟等以避免地面积水和地下水浸入路基，影响路基工作区内的土基强度与稳定性。土质挖方路基，须换填不少于60cm砂砾，石质挖方路基，须设置30cm砂砾垫层，横向排水不畅路段要加设盲沟。
2.1.3、明确路基填料质量标准要求在各级公路工程施工图设计中，必须明确不同填高内路基填料的CBR值（最小强度）及最大粒径要求。种植土、腐殖土、淤泥冻土及强膨胀土等劣质土严禁直接用于填筑路基。砾（角砾）类土应优先选作路床填料，土质较差的细粒土可填于路堤底部。
2.1.4、完善路基综合排水设计县级以上公路工程设计中，必须遵循因地制宜，整体规划，综合考虑的原则进行路基纵、横向排水设计，避免造成路基两侧长期积水浸泡路基，使路基承载力下降面发生沉降变形。在村屯路段必须设置排水边沟，平坡路段边沟须设有纵坡，确保排水通畅。高填方路段采用集中排水措施，并与警示桩、防撞墙统筹考虑，要求在每20-40m及主要变坡点处设置简易或永久性泄水槽。挖方段根据上边坡的汇水而积来设计截水沟，并考虑边坡土质和边坡，设置挡墙防止塌方，路基较低路段可以采取加设砂砾层及渗水盲沟，并加大、加深边沟等排水措施。
2.1.5、确保路基边坡稳定性高填、深挖路基的边坡应根据填料种类、边坡高度和工程地质条件等规范确定，高填路堤必须进行路基稳定性验算。填方边坡过高时，可考虑在边坡中部加置边坡平台。
2.1.6、积极采用路基综合防护形式积极推行植物防护与硬防护相结合的综合防护形式，在比较稳定的土质边坡采用种草、铺设草皮、植树等植物防护措施。岩体风化严重、节理发育、软质岩石、松散碎（砾）石土的挖方边坡以及受水流侵蚀，植物不易生长的填方边坡可采用护面墙、砌石等工程防护措施，沿河路基、受冰侵害和冲刷路段采用挡土墙、砌石护坡、石笼抛石等直接防护措施。
2.2、施工方面
2.2.1、做好施工组织设计，合理安排施工段的先后顺序，明确构造物和路基的衔接关系，对高填方段应优先安排施工，在施工中以施工组织设计为龙头，根据施工现场的实际情况，合理调配人员、设备，是保证高填方路基施工质量的重要环节。
2.2.2、做好施工前的准备工作，开工前要认真审阅设计文件，详细了解各段的填、挖情况，地质情况，填、挖土质和调配情况，对重要地段要作重点勘察，进一步核对设计资料，发现设计文件中有误及时上报业主，妥善处理。
2.2.3、认真清除地表土不良土质，加强地基压实处理，地表植被、树根、垃圾、不良土质（盐渍土，膨胀土等）必须予以清除，同时应加大地表的压实密度，采用大吨位振动压路机处置。
2.2.4、填筑路基前，首先，必须疏通路基两侧纵横向排水系统，避免路基受水浸泡。特别是地基土为黄土、粘土等细粒土，在干燥状态下（最佳含水量）结构比较强，有较强承载能力，一旦受水浸泡，将易形成翻浆或路基沉降，因此做好路基施工前排水畅通尤为重要，工程监理和施工质量自检人员应认真监督；其次，要严格选取路基填料用土。路基填料确定前，需进行土质分析、CBR值、标准击实等试验，对于种植土、腐殖土、淤泥、强膨胀土等劣质土和CBR值、最大粒径不能满足规范要求的材料，不能用于路基填筑；再则，路基填筑前还要根据设计进行施工放样，建立半永久性的临时水准点和坐标点并做好记录。路基坡脚放样一定要准确，确保路基宽度满足设计要求，路基坡角范围内，要求清除杂草、树根、淤泥等，并进行整形碾压，压实度须达到规范要求。旧路加宽、半填半挖段做好宽度不小6m的向内倾斜的台阶。
2.2.5、填石路基与鸡爪形地段路基施工，可利用重型夯实设备进行强夯处理，或将土工隔栅（土布）水平分层布置在填石路堤内，防止或减缓细料在填料空隙中的流动。
2.2.6、路基施工必须分层填筑，分层碾压，严禁路改工程中滚填，一般路段压实度不得大于30cm，构造物两侧（桥涵头处理）松铺厚度不得大于20cm.不同性质的土不能混填，同一种土填筑厚度不能小于50cm（两层）。路基填筑须全幅填筑，一次到位，严禁帮宽。碾压过程中，要控制好含水量，压实度达到规范要求后，方可进行后续施工，压实度检测每层2000㎡（不足2000㎡按2000㎡计）不少于4点。根据不同填土类型和压实厚度，选择好压实设备，对于砂砾土振动压路机具有滚压和振动双重作用，效果较好。
2.2.7、路堑施工要保证排水畅通，对上坡施工时，应注意确保坡体的稳定性，避免欠挖或超挖现象发生。石方爆破尽量采用中小炮，光面爆破的方法，避免大规模爆破形成松散面积过大，坡体失稳，机械开挖时，边坡应配以平地机或人工修整。路床顶面如有超挖，应清除松方并采用透水性材料进行回填，并认真碾压，压实度按路床项目标准进行控制。
