五氯酚钠诱导斑马鱼体细胞p53基因突变的克隆测序研究

摘要：目的研究五氯酚钠（NaPCP）对斑马鱼体细胞p53基因的致突变作用。方法设置5个不同浓度的NaPCP暴露组及空白对照组,采用Tubingen品系斑马鱼进行斑马鱼急性毒性试验计算半数致死浓度（LC50）,并依据急性毒性实验所得结果,设置1/10 LC50暴露剂量,暴露组与空白对照组各取10尾斑马鱼,在连续暴露45 d后提取斑马鱼肝脏组织RNA,采用反转录-聚合酶链式反应扩增p53基因c DNA序列,并进行测序分析。结果NaPCP急性毒性实验所得LC50为18.4μg/L,测序分析结果显示斑马鱼p53基因编码区序列长1125 bp,编码374个氨基酸,与Gen Bank已知Tubingen品系斑马鱼p53序列（GI：425876786）同源性为99.2%,与其他生物物种的p53序列存在一定差异。在NaPCP 1.8μg/L浓度下暴露45 d后,与对照组比较,暴露组斑马鱼p53基因序列的8、148和229位密码子发生GAG→AAG、CAT→CAG和CAG→CAA突变,导致所编码的p53蛋白发生Glu→Lys和His→Gln变异。结论 NaPCP是一种致基因突变物,可诱导斑马鱼体细胞p53基因发生突变,对人体可能有潜在的致基因突变风险。