摘要:目的研究人胰腺癌survivin mRNA转染树突细胞(DC)诱导的特异性抗肿瘤免疫反应,为DC疫苗治疗胰腺癌提供实验依据。方法自样本外周血单核细胞中分离和培养DC。体外转录和PCR扩增survivin mRNA后使用电穿孔法将其转染DC。采用实时定量PCR技术检测不同时间点DC中survivin的表达。用四甲基偶氮苯唑盐(MTT)法检测转染前后DC存活率变化。采用^51Cr标准细胞毒实验检测转染survivin mRNADC诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。使用γ-干扰素(IFN—γ)酶联免疫法检测转染survivin mRNADC诱导的CTL活化反应。结果survivin mRNA转染后48hDC中survivin mRNA表达水平最高(46.09±6.57)。转染后DC存活率稳定在80%左右。转染survivinmRNADC可有效诱导HLA-A2^+/survivin^+特异性CTL免疫反应。胰腺癌Capan-2细胞与对照组SCL-1细胞刺激survivin特异性CTL的24hIFN-7释放量分别为(28.79土5.70和(25.12±2.13)U/ml,差异无统计学意义(P=0.761)。结论人胰腺癌survivin mRNA体外转染DC可诱导CTL产生特异性抗肿瘤免疫。
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社