摘要:目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间充质干细胞(BMSCs)的凋亡变化及凋亡相关因子的表达。方法密度梯度离心和贴壁筛选法分离培养SLE患者及健康人骨髓MSCs,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞表面Fas、Bcl—2表达水平及Caspase 8活性;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测Fas、Bcl-2、Bax、Bcl—w、Caspase 8及凋亡细胞蛋白酶激活因子(Apaf)-1mRNA表达水平;免疫组织化学染色检测胞质细胞色素C表达水平;统计学采用Mann—Whitnev秩和检验。结果SLE患者BMSCs凋亡明显高于健康对照组[(64±10)%和(14±9)%,U=0,P〈0.05];SLE患者BMSCs抗凋亡因子Bcl-2蛋白表达显著低于健康对照组[(11±9)%和(56±18)%,U=0,P〈0.05],其mRNA表达水平同样显著低于健康对照(0.2±0.2和2.4±0.7,U=24,P〈0.05);SLE患者BMSCs胞质中细胞色索C表达显著增多[(56±21)%和(16+16)%,U=1,P〈O.05]。SLE患者BMSCs细胞内Caspase 8活性增强[(49±14)%和(16±12)%,U=0,P〈0.05],但基因表达水平与健康对照组比较差异无统计学意义(U=28,P〉O.05);SLE患者与健康对照组BMSCs均高表达Fas,差异无统计学意义(U=19,P〉0.05)。结论SLE患者BMSCs凋亡增多,可能与Bcl-2表达减少、胞质中细胞色素C表达增多和Caspase 8活性增强,从而激活内源性及外源性凋亡途径相关。
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