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慢病毒介导神经生长因子过表达诱导脐带间充质干细胞向神经元样分化

作者:陈浩浩; 郑群; 王文倩; 江文娇; 王飞凤; 傅晓艳; 张宁 金华职业技术学院医学院分子生物学实验室; 金华市人民医院生殖医学中心; 金华市思丹姆干细胞生物科技有限公司; 金华321000

摘要:目的探讨神经生长因子(NGF)过表达慢病毒转染脐带间充质干细胞(UMSCs)对细胞分化的影响。方法分离培养UMSCs,流式细胞术鉴定后利用慢病毒载体感染细胞,使其过表达NGF,72h后,通过免疫荧光检测NGF和GFP的表达,Western blot检测NGF蛋白表达水平,ELISA法检测细胞上清液NGF的含量,qRT-PCR检测相关神经因子基因的表达。结果流式细胞术显示细胞表面CD105、CD90、CD73阳性而CD34、CD45、CD19和CD14阴性,鉴定为脐带间充质干细胞。慢病毒转染后细胞NGF和GFP阳性,细胞内NGF和培养液中b-NGF含量都显著性增加,NGF、nestin、GFAP、MAP2及tubulin等mRNA的表达显著性增加。结论神经生长因子过表达慢病毒转染脐带间充质干细胞会促使细胞向神经元样细胞分化,可应用于后续研究。

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中国组织化学与细胞化学

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国际刊号:1004-1850

国内刊号:42-1300/Q

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