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蓝舌病毒NS2蛋白的抗体制备及鉴定

作者:张国芮; 独军政; 高闪电; 田占成; Darien; Kheder; Ali; Mohamed; 康棣; 郭艳妮; 薛慧文; 殷宏 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 兰州730046; 甘肃农业大学动物医学院; 兰州730070; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 扬州225009

摘要:本研究参考GenBank中蓝舌病毒16型(Bluetongue virus serotype16,BTV-16)标准株RSAvvvv的序列,人工合成编码BTV-16NS2蛋白的S8基因,将其亚克隆至原核表达载体pPRoEx-HTb中,构建重组表达质粒pPro-NS2,并转化大肠杆菌BL21进行IPTG诱导表达,并进行可溶性分析。SDS-PAGE结果显示,表达的rNS2蛋白主要以包涵体的形式存在于菌体中。利用组氨酸标签纯化树脂获得了高纯度的NS2蛋白,免疫新西兰白兔制备抗NS2蛋白的多克隆抗体。Westernblot结果显示,制备的抗NS2蛋白多克隆抗体不仅可与重组表达的rNS2蛋白反应,而且可与BTV感染细胞后的天然NS2蛋白反应。间接免疫荧光结果显示,该抗体也可与BTV感染C6/36细胞中的天然NS2蛋白反应,且发现NS2大量分布于C6/36细胞的胞质中。本研究所制备的NS2蛋白的多克隆抗体具有很好的反应性和特异性,为进一步研究NS2蛋白的功能奠定了基础。

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中国动物传染病学报

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国际刊号:1674-6422

国内刊号:31-2031/S

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