“-GCT（A）GCGAGATC-”序列负向调控Nanog基因启动子-135/-230区活性研究

摘要：目的 探究Nanog启动子-332/＋50区与双荧光素酶报告载体pGL4.10连接后负向调节Nanog-135/-230区活性的调节序列。方法 截短法将Nanog启动子-812-＋171区不同片段与pGL4.10载体连接,脂质体转染法将各载体分别与内参载体pRL-TK共转入细胞,双荧光素酶系统报告系统检测报告基因的表达变化。结果 Nanog启动子-812/-332区、＋50/＋171区及-332/＋51（或＋56）区均不含Nanog-135/-230区的负向调控元件,改变Naong-332/＋50区与报告载体pGL4.10的连接位点（NheⅠ,BglⅡ）行成序列“-GCT（A）GCGAGATC-”即可消除Nanog启动子-332/＋50对报告基因的正向调控作用。结论 待检测启动子与载体连接构成“-GCT（A）GCGAGATC-”序列后可负向调控Nanog-135/-230区的活性。