纳米羟基磷灰石／细菌纤维素对兔骨髓间充质干细胞黏附及成骨分化的影响

摘要：目的观察纳米羟基磷灰石／细菌纤维素（nHA／BC）复合支架对兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）的黏附及成骨分化的影响，以探讨其在骨组织工程领域潜在的应用价值。方法培养及鉴定兔BMSCs，将BMSCs与nHA／BC体外复合，倒置相差显微镜及扫描电镜观察BMSCs与nHA／BC的复合情况。利用诱导培养基诱导细胞成骨分化，观察细胞分化过程中的形态变化、扫描电镜观察矿化基质沉积。结果第3代BMSCs呈均匀一致的长梭形，流式细胞仪检测其表面抗体CD44阳性，CIM5阴性。倒置相差显微镜下观察BMSCs能够在表面有效的黏附生长，保持细胞形态，至7天时细胞融合成片。扫描电镜观察：nHA／BC呈三维立体多孔结构，BMSCs与nHA／BC复合后，BMSCs伸出伪足黏附在表面及孔隙内，细胞相互连接、融合。细胞诱导后呈现明显的成骨细胞特征，可见钙结节生成。扫描电镜观察可见nHA／BC膜上明显的矿物质沉积，并与nHA／BC膜紧密相连，结节中可见大量粗大的颗粒。结论nHA／BC能促进兔BMSCs黏附，为成骨分化提供结构支撑。