摘要:目的研究miR-29b-3p靶向GRM4对前额皮质神经元凋亡的影响及作用机制。方法培养原代前额皮层神经元,转染miR-29b-3p的mimics和inhibitor至原代前额皮层神经元,采用qRT-PCR及WB方法检测miR-29b-3p及GRM4表达水平,MTT法检测神经元细胞活力,流式细胞技术检测神经元细胞凋亡,免疫双标法检测GRM4与凋亡相关蛋白(cleaved caspase-3)关系;采用双荧光素酶法检测miR-29b-3p靶向GRM4基因的机制。结果激活miR-29b-3p表达使前额皮层神经元细胞GRM4表达降低,神经元细胞活力增加,细胞凋亡减少;抑制miR-29b-3p表达使前额皮层神经元细胞GRM4表达增加,神经元细胞活力降低,神经元细胞凋亡增加。免疫双标法结果显示,前额皮层神经元GRM4表达水平与凋亡相关蛋白表达水平呈正相关关系;双荧光素酶法证实GRM4是miR-29b-3p发挥作用的靶点。结论MiR-29b-3p通过抑制GRM4表达降低前额皮层神经元凋亡。
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