摘要：谷氨酰胺转氨酶(EC2.3.2.13, Transglutaminase, TGase)是一种重要的食品酶。基于N-端酶原区对折叠的重要影响,TGase通常以无活性的酶原(pro-TGase)形式在异源宿主中表达。以茂源链霉菌( Streptomyces mobaraensis )pro-TGase为基因来源,重组解脂耶氏酵母( Yarrowia lipolytica po1h)为研究对象,通过在pro-TGase插入宿主Kex2蛋白酶识别位点(策略1)和共表达pro-TGase与谷氨酰胺转氨酶激活金属蛋白酶(TAMEP,策略2),使pro-TGase在 Y. lipolytica 中表达后被切除酶原区,而直接转化为活性TGase。摇瓶发酵结果显示,策略1和策略2构建得到的重组菌的TGase活力分别为5.26 U/mL和6.77 U/mL。酶学性质研究表明,策略1和策略2得到的重组菌的TGase比酶活、 Km及k cat / Km 均明显优于 S. mobaraensis TGase。基于 Y. lipolytica 食品安全性,研究结果为TGase的工业化生产提供了新型高产菌种。