摘要:MYB相关CDC5(Cell division cycle 5)蛋白对于细胞周期G2期的正常进行是必须的,但是在植物中对这种蛋白质的研究还较少涉及。本试验测量比较野生型拟南芥(Col-0生态型)和AtCDC5T-DNA插入缺失突变体(GK_278B09)的主根生长速度和长度,利用瞬时表达AtCDC5-GFP研究AtCDC5在拟南芥叶片叶肉细胞中的定位,同时利用AtCDC5N端144个氨基酸在大肠杆菌中进行原核表达和纯化,免疫家兔获得针对AtCDC5的多克隆特异性抗体,从表型、细胞和蛋白质水平研究AtCDC5基因的功能。结果表明,GK_278B09的主根因发育受到抑制而生长速度缓慢;AtCDC5-GFP融合蛋白主要定位于细胞核中;经过分离得到的AtCDC5蛋白抗血清能够有效地检测出10ng原核表达的AtCDC51-144抗原,并在原生质体AtCDC5过表达体系中检测出1条分子量约为120000的条带,此条带与AtCDC5-GFP大小相近。本研究成功制备出AtCDC5蛋白的多克隆抗体,为进一步研究AtCDC5蛋白影响细胞周期从而影响植物生长发育提供了研究基础。
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