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恶性疟原虫PfMAg-1对裂殖子入侵功能的影响

作者:高雪; 王振生; 高宇辉; 王恒 中国医学科学院基础医学研究所病原生物学系; 北京100005

摘要:恶性疟原虫PfMAg-1蛋白为裂殖子表面相关蛋白,为了探究PfMAg-1的功能,本研究采用规律成簇间隔短回文重复及相关失活蛋白(Clustered regulatory interspaced short palindromic repeats/dead CRISPR-associated protein 9,CRISPR/dCas9)技术,构建恶性疟原虫PfMAg-1低表达质粒,电穿孔方法转染后通过抗稻瘟菌素(Blasticidin S Deaminase,BSD)筛选出恶性疟原虫MAg1KD(Knock Down,KD)虫株.通过聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)、 实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative Real Time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)检测PfMAg-1表达水平.在体外培养条件下观察MAg1KD虫株生长趋势及裂殖子入侵效率来评价PfMAg-1的表达对恶性疟原虫红内期增殖的影响.结果表明,恶性疟原虫MAg1 KD虫株较对照虫株的体外生长率显著降低,进一步实验提示影响疟原虫增殖速度的原因是MAg1 KD虫株裂殖子入侵效率下降.本研究证实PfMAg-1在恶性疟原虫裂殖子入侵红细胞时发挥重要作用,为进一步评价PfMAg-1蛋白作为疟疾疫苗候选抗原的前景提供了实验依据.

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寄生虫与医学昆虫学报

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国际刊号:1005-0507

国内刊号:11-3158/R

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