不同细胞外泌体的分离与特性研究

摘要：目的探究人肺癌细胞A549与小鼠黑色素瘤细胞B16-F10不同细胞外泌体的性质及促细胞增殖能力的差异。方法采用超速离心法及Exo Qμick试剂盒法提取A549细胞及B16-F10细胞培养上清液中的外泌体;利用透射电镜观察外泌体的形态,采用动态光散射法测定粒径,用SDS-PAGE电泳技术分析外泌体的蛋白分布,采用Western blot技术分析其特异蛋白TSG 101的表达,用MTT法测定外泌体促细胞的增殖能力。结果超速离心法和Exo Qμick试剂盒法均可用于提取外泌体,A549及B16-F10细胞外泌体均呈圆形膜性囊泡结构;提取的外泌体样本均有外泌体特异性标记蛋白TSG 101的表达,B16-F10细胞外泌体促细胞增殖能力更佳。结论超速离心法分离的外泌体纯度高,促细胞增殖能力好。