靶向沉默HIF-1α和Survivin基因对鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响

摘要：目的：探讨RNAi靶向沉默人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和/或生存素（Survivin）基因对裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响。方法：设计合成靶向沉默HIF-1α和/或Survivin的microRNA干扰质粒,采用脂质体转染法将HIF-1α和/或Survivin的microRNA干扰质粒转染到CNE-2细胞;取35只4～6周龄的雌性BALA/c裸鼠,随机均分为HIF-1α干扰组、Survivin干扰组、HIF-1α＆Survivin干扰组（联合干扰组）、空载组和阴性对照组;分别给予相应转染后的CNE-2细胞注射至裸鼠右侧腋窝皮下,待各组裸鼠成瘤后,给予5Gy X-射线照射,每隔3 d放疗1次,共15Gy X-射线,观察各组裸鼠放疗前后的肿瘤体积,照射结束3 d后处死裸鼠,测量瘤体体积,计算肿瘤体积增加率;RT-q PCR法检测瘤体组织中的HIF-1α和Survivin mRNA表达水平,Western Blot法检测HIF-1α和Survivin蛋白表达水平,TUNEL试剂盒检测鼻咽癌裸鼠移植瘤中细胞凋亡。结果：HIF-1α干扰组、Survivin干扰组与联合干扰组经过放射治疗后肿瘤体积增加率明显小于空载体组与阴性对照组（P〈0.05）;HIF-1α干扰组、Survivin干扰组与联合干扰组瘤体组织中HIF-1α、Survivin mRNA和蛋白质表达水平显著低于空载组与阴性对照组,细胞凋亡率高于空载组与阴性对照组（P〈0.05）;HIF-1α干扰组、Survivin干扰组及联合干扰组瘤体组织中HIF-1α、Survivin mRNA和蛋白质表达水平及细胞凋亡率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：单独干扰HIF-1α、Survivin基因与联合干扰HIF-1α和Survivin基因均能够增加鼻咽癌裸鼠移植瘤对放疗敏感性,但联合干扰并没有进一步提高鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗敏感性。