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阿胶肽图前处理胶原蛋白酶解条件研究

作者:童芯锌; 叶茂; 张涵; 白静; 国锦琳 成都中医药大学中药材标准化教育部重点实验室; 四川成都611137; 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地; 四川成都611137

摘要:目的:建立标准化的阿胶蛋白酶解条件。方法:分别通过加热法、超声法及液氮碾磨法提取阿胶蛋白;通过二氯甲烷-环己烷萃取和超滤法纯化阿胶蛋白;采用序列分析级胰酶进行酶解,分别考察4个酶解参数(温度、时间、酶的剂量和pH值)对酶解结果的影响,通过Tricine-SDS-PAGE法检测酶解效果。结果:超声法溶解阿胶样品效果相对较好,酶解参数最佳条件为:酶解温度38℃,pH 8.0,酶解时间12 h以上,底物与酶体积比在4:1-1:1范围内,计算酶活为0.1-0.4 mU(mg/μmol)。结论:建立了标准化的阿胶肽图前处理胶原蛋白胰酶酶解条件,为基于肽图谱法阿胶鉴别及质量控制方法的建立打下基础。

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成都中医药大学学报

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国际刊号:1004-0668

国内刊号:51-1501/R

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